domingo, 25 de julio de 2021

Ácidos Nucleicos Recombinantes 🧬

julio 25, 2021 Posted by Sebastián Bayas 1 comment

ADN recombinante en la naturaleza

Un claro ejemplo es el proceso de transformación de las bacterias donde la esta capta el ADN libre que se encuentra en el ambiente, generalmente en plásmidos que liberan otras bacterias. Los plásmidos actúan como vectores de ADN, suelen ser los portadores de genes que brindan a las bacterias resistencia a los antibióticos.




ADN recombinante artificial en la Esclerosis Lateral Amiotrófica (ELA)

Un factor clave en la patología de la ELA es la proteína TDP-43 que cuando está mal localizada citoplasmáticamente tiene propiedades tóxicas similares a los priones, que afectan a las neuronas motoras. Actualmente se intenta emplear oligomeros recombinantes de TDP-43 en astrocitos para que actuen como neuroprotectores de las neuronas motoras frente a la proteinopatía de TDP-43.


T: Posible respuesta neuroprotectora de los astrocitos con oligómeros recombinantes de TDP-43 en la proteinopatia de TDP-43 en la ELA.
O: Comprobar toxicidad de TDP-43 y el efecto neuroprotector de los astrocitos con el agregado de oligómeros recombinantes de TDP-43.
G: Gen TARDBP43: 324pb.
ER: No especifíca.
EL: No especifíca.
V: pTriEX-4 Ek / LIC.
CR: Células HEK293, neuronas motoras y astrocitos derivados de iPSC humanas.
MTG: Transfección por método químico mediante lipofectamine 3000 o PULsin (polyplus transfection).
MIC: Cultivo, Dot Blot.

Referencias Bibliográficas




martes, 13 de julio de 2021

Microarray para el Streptococcus pneumoniae, técnica de hibridación de ADN neumocócico 💾

julio 13, 2021 Posted by Sebastián Bayas 1 comment

La prueba de microarray es una técnica basada en la hibridación de ADN. En el caso del S.pneumoniae nos permite hacer un análisis proteómico con anticuerpos, así encontramos un amplia gama de patrones de antígenos neumocócicos lo que nos permite emplear un microarray de proteoma constituido por alrededor de 2,000 proteínas pertenecientes al S.pneumoniae. El uso de esta técnica de microarray de proteoma comprobó la gran afinidad de la IgA por los antígenos potenciales de S.pneumoniaeLa caracterización de la respuesta inmune a las proteínas neumocócicas es fundamental para comprender la epidemiología y la vacunación de esta bacteria.


Referencias Bibliográficas

lunes, 5 de julio de 2021

Prueba de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en la Neumonía por Neumococo 🔬

julio 05, 2021 Posted by Sebastián Bayas 1 comment

La PCR es empleada para detectar ADN neumocócico, este examen se enfoca en detectar genes como la autolisina A (LytA), neumolisina (PLY) y el Spn9802. Actualmente la PCR se enfoca en el gen LytA (encargado de la liberación de productos bacterianos proinflamatorios) generando un producto de amplificación de 927 pb. Esta técnica resulta efectiva en muestras extraídas por métodos invasivos como el LCR, líquido pleural y aspirados de pulmón. No resulta eficiente en muestras de sangre debido a que las dianas genéticas son homólogas con otras bacterias, por lo que esta prueba aún no puede reemplazar a la detección de antígenos neumocócicos en la orina como método de rutina para diagnosticar esta enfermedad. 


Detección de ADN neumocócico en muestras de sangre utilizando la reacción en cadena de la polimerasa.

O: Investigar el rendimiento de la PCR en muestras de sangre para el diagnóstico de neumonía neumocócica en niños.
M: Sangre; extracción: usando el mini kit QIAamp DNA blood 
AN: ADN genómico (ADN neumocócico)
G: Gen de la autolisina lyt A: 927 pb
PCR: PCR cuantitativa en tiempo real
V: No especifica
SA: > 6.9 log 10 copias / mL 
EA: 88% a 99% 

Asociación entre la carga de la reacción en cadena de la polimerasa neumocócica (PCR) (log 10copias / ml) en muestras nasofaríngeas / orofaríngeas (NP / OP) y de sangre total (WB).

Información extra sobre el examen PCR


Referencias Bibliográficas

sábado, 3 de julio de 2021

Alteraciones de la Epigenómica en la Neumonía por Neumococo 🚨

julio 03, 2021 Posted by Sebastián Bayas 1 comment

Los cambios epigenéticos tienen una relación directa con la expresión génica de los macrófagos alveolares en respuesta al ataque de S. pneumoniae. La neumolisina es expresada por S. pneumoniae, esta es una toxina clave para la virulencia ya que promueve la transmisión, la supervivencia y la invasión del torrente sanguíneo por S. pneumoniae. La neumolisina altera los procesos epigenéticos mediante la desfosforilación de la serina 10 en la histona H3 de los macrófagos alveolares lo que provoca una menor liberación de citocinas y atenúa la respuesta de TNF-α, aumentando la supervivencia bacteriana limitando la respuesta inflamatoria del huésped.


Referencias Bibliográficas


domingo, 27 de junio de 2021

Alteraciones de la Traducción en la Neumonía por Neumococo 🧬

junio 27, 2021 Posted by Sebastián Bayas No comments

Los ribosomas llevan a cabo la síntesis de proteínas que es el objetivo de la traducción. En este estudio se analiza la ARNasa R encontrada en la S. pneumoniae, la ARNasa R neumocócica participa directamente en las transcripciones de RRF, EF-G e IF3 respectivamente. El factor de reciclaje del ribosoma (RRF) y el factor de elongación G (EF-G), catalizan la división transitoria del ribosoma 70S en subunidades, esta división se estabiliza el IF3. Esto asegura el nivel preciso de ribosomas 70S en la célula. Por lo que una alteración en la ARNasa R repercutiría directamente en los procesos de traducción de la S. pneumoniae afectando a la maquinaria principal de dicho proceso disminuyendo virulencia y supervivencia bacteriana. 


Referencias Bibliográficas

sábado, 19 de junio de 2021

Alteraciones de la Transcripción en la Neumonía por Neumococo 🔬

junio 19, 2021 Posted by Sebastián Bayas 1 comment

Estos hallazgos afirman que el factor de transcripción KLF4 actúa como un contrarregulador de la respuesta inmune innata proinflamatoria en el pulmón durante la neumonía por neumococo, el KLF4 es capas de inducir o suprimir la transcripción de genes de la respuesta inmune como las interleucinas.  El ADN neumocócico induce la expresión de KLF4 en células epiteliales pulmonares, una alteración en este factor de transcripción puede repercutir en una hiperinflamación pulmonar y posterior falla orgánica.


Referencias Bibliográficas